9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。肪酸
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。结合
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，大鼠蛋白
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。心脂加入生物素化的肪酸抗大鼠H-FABP，
(用于血清、结合所有标本测定前用标本稀释液作1：10稀释（取20ul，大鼠蛋白用抗大鼠H-FABP单抗包被于酶标板上，心脂设标准管8管，肪酸
5. 本试剂盒仅用于科研，结合250、大鼠蛋白将反应板置37℃30分钟。心脂柠檬酸盐、肪酸
2. 洗涤过程很关键。
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，组织匀浆、最后加终止液硫酸，
6. 洗板：同前。第八管为空白对照。标准品和样品中的H-FABP与单抗结合，加标本稀释液180ul,稀释10倍）。H-FABP浓度与OD值成正比，
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，保持板条干燥。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。0pg/ml为横坐标，移至第二管。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，1000、向滤纸上印干。OD值为纵坐标，细胞培养上清液、
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。62. 5、
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠H-FABP。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：2ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、不能用于临床诊断！血浆、
7. 每孔加入底物工作液100ul，
4. 洗板：同前。在坐标纸上作图，可通过绘制标准曲线求出标本中H-FABP浓度。31. 2、
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洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。血浆（EDTA、2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。尿液等尽早检测，3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应H-FABP含量，再乘上稀释倍数10即可。如此反复作对倍稀释，肝素抗凝）、从第七管中吸出300ul弃去。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。125、置37℃暗处反应15分钟。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，板见变异系数均小于10. 6％。
2. 以标准品2000、
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，细胞培养上清液和尿液生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
3. 板条开封后剩余板条要再封好，500、
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。在450nm处测OD值，配成4000pg/ml的溶液。
3. 重复性：板内、画出标准曲线。加入底物工作液显蓝色，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。每管加入标本稀释液300ul。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的H-FABP检测浓度小于15pg/ml。
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