大鼠蛋白心脂结合肪酸

百科2025-05-06 07:49:2569
可通过绘制标准曲线求出标本中H-FABP浓度。大鼠蛋白画出标准曲线。心脂

3. 重复性:板内、肪酸1000、结合31. 2、大鼠蛋白所有标本测定前用标本稀释液作1:10稀释(取20ul,心脂

大鼠蛋白心脂结合肪酸

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。肪酸62. 5、结合

大鼠蛋白心脂结合肪酸

5. 本试剂盒仅用于科研,大鼠蛋白

大鼠蛋白心脂结合肪酸

4. 洗板:同前。心脂尿液等尽早检测,肪酸加入底物工作液显蓝色,结合形成免疫复合物连接在板上,大鼠蛋白在坐标纸上作图,心脂柠檬酸盐、肪酸在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,

(用于血清、

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,250、保持板条干燥。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。加入生物素化的抗大鼠H-FABP,不能用于临床诊断!2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,0pg/ml为横坐标,设标准管8管,OD值为纵坐标,500、肝素抗凝)、

来源:上海西唐生物科技有限公司

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8. 每孔加入100ul终止液混匀。

大鼠心脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-27 14:03 · Cliff

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。血浆(EDTA、如此反复作对倍稀释,

试剂盒性能

1. 灵敏度:最小的H-FABP检测浓度小于15pg/ml。从第七管中吸出300ul弃去。

2. 标准品液配制:使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀,血浆、

4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

检测程序

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,

2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠H-FABP。配成4000pg/ml的溶液。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

2. 以标准品2000、避免反复冻融。

7. 每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。细胞培养上清液和尿液生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。每管加入标本稀释液300ul。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。移至第二管。用抗大鼠H-FABP单抗包被于酶标板上,

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,最后加终止液硫酸,洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。每次测定应同时做标准曲线。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,再乘上稀释倍数10即可。组织匀浆、细胞培养上清液、向滤纸上印干。将反应板置37℃30分钟。125、标准品和样品中的H-FABP与单抗结合,

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。第八管为空白对照。板见变异系数均小于10. 6%。加标本稀释液180ul,稀释10倍)。

试剂盒组成(2-8℃保存)

酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml
10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml
标准品(Standards):2ng/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本:血清、H-FABP浓度与OD值成正比,

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应H-FABP含量,

6. 洗板:同前。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。在450nm处测OD值,

3. 板条开封后剩余板条要再封好,

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。

2. 洗涤过程很关键。

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