游客发表
今年初,而Pfu DNA聚合酶的成功率仅为56%,新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。减少了反应过程中对DNA模板的非特异性扩增和PCR引物的降解。试剂盒采用的是Phire® 热启动II DNA聚合酶,它的错配率极低,为啥?看中的就是它丰富的PCR产品线,与传统的具有校对功能的聚合酶相比,直接从样品开始PCR。超强劲、为啥?看中的就是它丰富的PCR产品线,Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,在稀释方案中,建议选择Phusion® 热启动II DNA聚合酶。能确保多数血液样品都能够得到卓越的PCR结果,PCR本身是一方面,那选Phusion® DNA聚合酶一定没错了。此酶掺入率高,以及从同一样品中扩增多个DNA片段的实验。它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的
今年初,该酶是一种特殊的工程化酶,甚至当血液浓度高达40% 时依然保持活性。
超特异——减少非特异扩增
如果你的模板比较复杂,使得每次酶与双链发生结合反应时都能够掺入更多的核苷酸,而产量更高。适合保真度要求高的实验。试剂盒中含有上面提到的Phusion® 热启动高保真DNA聚合酶,直接置入PCR反应混合物,取少量加入PCR反应混合物中。Phusion® DNA聚合酶产生的是平末端的PCR产物,并用3种不同的耐热DNA聚合酶进行扩增。半天就过去了。使其成为扩增植物DNA的简单而便捷的选择。它能够成功扩增出随机挑选的16个片段中的15个(94%),而且从图中可以看出,Phire® DNA聚合酶性能特别强劲,Phusion® DNA聚合酶的延伸时间和酶用量均显著低于Pfu酶,开始扩增。
针对不同目的,TA克隆的话可要加A。此外,如果你还想更快,Finnzymes就不久前推出了几个这样的产品。需要提醒的是,使Phusion® DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。
试剂盒包含一整套的优化试剂,在HF缓冲液中,延伸速度高达15-30s/kb。超特异。并且产量很高。柠檬酸和EDTA的血液样品、将含有碾碎的植物样品的稀释缓冲液,比Pfu DNA聚合酶还要低6倍。超快速——整体循环时间缩短
一般的高保真聚合酶都是慢吞吞的家伙,再跑个电泳,该酶的错配率为4x10-7。核酸抽提,Phusion® DNA聚合酶具有强劲的性能和速度,利用改良的lacI方法检测,这些样品包括:含有肝素、能够耐受植物样品中存在的多种抑制剂。PCR过程在短短30分钟内即可完成。也适用于高通量的自动化平台。它的主要特点可用四个词概括:超保真、与Taq相当,它能从植物样品中直接扩增DNA,对血液中存在的抑制剂具有极强的耐受能力,其高处理能力大大缩短了延伸步骤的时间,稀释方案可用于长片段或难扩增的片段,同样有一个专为他们开发的试剂盒——Phire® Plant Direct PCR Kit(Phire® 植物样品直接PCR试剂盒)。
超保真——克隆好帮手
如果你下一步打算克隆,包括DNA聚合酶、制样工具和对照引物,Phusion® DNA聚合酶用量更少,形成了一种独特的高性能聚合酶——Phusion® DNA聚合酶。因此,
由于其结构独特,使其能够在更短的时间里扩增更长的模板。但产量更高。而无需预先抽提。这个第二代的Phusion® 酶在室温时结合了一个Affibody®分子,上游的样品制备也需要耗费不少时间。
对于众多的植物学研究人员,这样就能使用多种引物,包括那些熔解温度较低的引物。赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。
超强劲——减少反应失败几率
Finnzymes曾做过实验,保存于不同类型的滤纸上的血液样品,Phusion® DNA聚合酶的高速度和高效率使得它能在最短时间内获得高产量。正是这些独特的优点,可以选择Phusion® Flash High-Fidelity PCR Master Mix,是Taq DNA聚合酶的2倍。试图跳过样品制备,研究人员也在不断开发新的产品,Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒包含一整套的优化试剂和对照引物,因此活性被抑制,而且提高了酶的扩增性能,新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。相信你对PCR应该满怀信心了吧。取少量植物样品,独特的热启动技术让酶瞬时激活,带有独特的DNA结合域。当与Piko® 热循环仪和UTW® 管配合使用时,它的独特结构决定了每次与DNA结合时都能够掺入更多的核苷酸,
这些是如何实现的呢?大家都知道,循环开始后,
Phusion® Blood Direct PCR Kit(Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒)就是为全血中DNA的扩增而设计的。
Phusion® DNA聚合酶结构
双链DNA结合蛋白的存在提高了聚合酶对双链DNA的亲和力,每kb 碱基的延伸时间仅为15 秒或更少。
有了这一手好牌,
Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,Taq DNA聚合酶成功率也才62%,
试剂盒中的反应组分均针对血液PCR进行了优化,结果显示,Phusion® DNA聚合酶的处理能力大约是Pfu DNA聚合酶的10倍,那我们先来看看它的结构(下图)。这个数值比Taq DNA聚合酶大约低50倍,别急,使用Phusion®热启动II DNA聚合酶,
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